GFP是綠色熒光蛋白（Green Fluorescent Protein）的縮寫，是科學(xué)實(shí)驗(yàn)室基因編輯研究的一種常用報(bào)告基因，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究中。析浦的GFPfinder-2101便攜式GFP激發(fā)光源被廣泛用于檢測(cè)GFP的表達(dá)。如果使用GFP激發(fā)光源照不出GFP 熒光，可能有以下幾個(gè)原因：

1. 激發(fā)光源選型問(wèn)題：確保使用的激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP的熒光，常用的 GFP激發(fā)光源波長(zhǎng)有紫外365nm波段和450-490nm的藍(lán)光波段。如果是wtGFP或avGFP，建議選用析浦的GFPfinder-2101UV紫外激發(fā)光源，如果是增強(qiáng)型綠色熒光蛋白，建議選用析浦的GFPfinder-2101RB藍(lán)色激發(fā)光源。如果激發(fā)光源的波長(zhǎng)不正確或者強(qiáng)度不夠，可能無(wú)法激發(fā)GFP熒光。

2. GFP表達(dá)問(wèn)題：確保目標(biāo)細(xì)胞或組織中成功表達(dá)了GFP。如果GFP沒(méi)有正確表達(dá)或者表達(dá)量過(guò)低，可能導(dǎo)致無(wú)法檢測(cè)到熒光。

3. 細(xì)胞狀態(tài)問(wèn)題：細(xì)胞的狀態(tài)也可能影響 GFP 的熒光強(qiáng)度。如果細(xì)胞處于凋亡、壞死或者過(guò)度處理等狀態(tài)，可能導(dǎo)致 GFP 熒光減弱或消失。

4. 熒光淬滅問(wèn)題：某些因素可能導(dǎo)致 GFP 熒光淬滅，例如光照過(guò)強(qiáng)、溶液中的pH值等。嘗試調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件以減少熒光淬滅的影響。

5. 熒光觀察眼鏡問(wèn)題：確保儀器的波段選擇正確，包括激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)、增益等參數(shù)。如果選擇不匹配的熒光觀察眼鏡，可能無(wú)法檢測(cè)到 GFP 熒光，部分廠家提供的觀察眼鏡和GFP激發(fā)光源不匹配，造成熒光觀察眼鏡過(guò)多的過(guò)濾掉了GFP的熒光，或者激發(fā)光截止深度不夠，造成視野過(guò)多的激發(fā)光，嚴(yán)重干擾了GFP熒光。

如果以上方法都無(wú)法解決問(wèn)題，建議嘗試使用熒光顯微鏡來(lái)檢測(cè)GFP熒光或更換不同波段的激發(fā)光源等。同時(shí)，也可以咨詢析浦科學(xué)儀器的技術(shù)工程師，以獲取更多的建議和幫助。

上圖：GFP在煙草葉片的表達(dá)

GFP 的激發(fā)光源主要類型：

1. 紫外線光源：紫外線光源是常用的 GFP 激發(fā)光源之一，可以通過(guò)紫外線激發(fā) GFP 熒光。紫外線光源通常使用大功率紫外線led光源，通過(guò)濾光片或光柵等光學(xué)元件過(guò)濾出特定波長(zhǎng)的紫外線，然后照射到 GFP標(biāo)記的樣本上，激發(fā) GFP發(fā)出綠色熒光，常用的型號(hào)有GFPfinder-2101uv。

2. 藍(lán)光光源：藍(lán)光光源也是常用的 GFP 激發(fā)光源之一，可以通過(guò)藍(lán)光激發(fā) GFP 熒光。藍(lán)光光源通常使用藍(lán)色LED模組為光源，通過(guò)濾光片或光柵等光學(xué)元件過(guò)濾出特定波長(zhǎng)的藍(lán)光，然后照射到 GFP 標(biāo)記的樣本上，激發(fā) GFP綠色熒光，常用的型號(hào)有GFPfinder-2101RB。

3. 白光光源：白光光源也可以用于 GFP熒光的激發(fā)，但其激發(fā)效率相對(duì)較低。白光光源通常使用氙燈作為光源，通過(guò)濾光片或光柵等光學(xué)元件過(guò)濾出特定波長(zhǎng)的光，然后照射到 GFP 標(biāo)記的樣本上，激發(fā) GFP 熒光,因此光源的激發(fā)效率低，這種類型的激發(fā)光源不推薦。

以上是常用的 GFP 激發(fā)光源類型，不同類型的激發(fā)光源具有不同的特點(diǎn)和應(yīng)用領(lǐng)域，需要根據(jù)具體需求和實(shí)驗(yàn)條件來(lái)選擇合適的GFP激發(fā)光源。

上圖：GFP在煙草葉片的表達(dá)

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