摘要：DsRed2是在珊瑚盤藻中發(fā)現的一種紅色熒光蛋白，激發(fā)光波長561nm，發(fā)射光波長587nm。紅色熒光蛋白DsRed2是一種理想的可視化報告基因，為轉基因愈傷組織提供了一種早期篩選工具。紅色熒光不僅可以在愈傷組織和體細胞胚中檢測到，而且可以在成熟植物的大多數組織和器官中檢測到。DsRed2的光譜特性與綠色熒光蛋白GFP有明顯不同，消光系數和熒光量子產率更高。

紅色熒光蛋白DsRed2

在植物生物技術中，遺傳轉化是研究基因功能和改善植物在不同脅迫下表現的有力工具。熒光蛋白作為報告基因，長期以來已被廣泛應用于許多植物和作物的遺傳轉化研究。綠色熒光蛋白GFP是廣泛使用的轉基因報告基因之一，GFP使用簡單，無需額外的蛋白質、底物或輔因子即可測量熒光。

DsRed2是在珊瑚盤藻中發(fā)現的一種紅色熒光蛋白，DsRed2的光譜特性與綠色熒光蛋白GFP有明顯不同，消光系數和熒光量子產率更高。紅色熒光蛋白DsRed2是一種理想的可視化報告基因，為轉基因愈傷組織提供了一種早期篩選工具。紅色熒光不僅可以在愈傷組織和體細胞胚中檢測到，而且可以在成熟植物的大多數組織和器官中檢測到。紅色熒光蛋白DsRed主要用于動物成像，在植物中成功報道DsRed紅色熒光蛋白是在轉基因煙草中，其瞬時表達和穩(wěn)定轉化并未對植物發(fā)育和形態(tài)發(fā)生產生不利影響。從那時起，紅色熒光蛋白DsRed就被用于多種植物轉基因研究，例如大豆、水稻和核桃。因此，紅色熒光蛋白DsRed可能成為植物生物技術和分子育種更好的替代報告標記。

華中農大于2018年在The Crop Journal發(fā)表的一篇文獻中，將紅色熒光蛋白DsRed2作為可視化報告基因應用于棉花遺傳轉化，以研究其作為棉花生物技術和分子育種報告標記的能力。在轉基因棉花植株體細胞胚胎發(fā)生的不同階段以及幾乎所有器官和組織中都檢測到了紅色熒光蛋白DsRed2的表達。為了確定紅色熒光蛋白DsRed2基因是否能在不同的遺傳背景下表達，將轉基因植株與四個不同的品種雜交。分析了35S啟動子上的DNA甲基化，以找出紅色熒光蛋白DsRed2表達水平與35S啟動子上DNA甲基化之間的關聯。該研究表明紅色熒光蛋白DsRed2可能成為棉花遺傳轉化和分子育種計劃的有用工具。

紅色熒光蛋白DsRed2的激發(fā)發(fā)射光譜

下圖是紅色熒光蛋白DsRed2的激發(fā)發(fā)射光譜圖。DsRed2激發(fā)光波長561nm，發(fā)射光波長587nm，可以用紅色熒光蛋白手電筒GFPfinder-2101GR，激發(fā)煙草、擬南芥等各種動植物中的DsRed2發(fā)出紅色熒光。

激發(fā)紅色熒光蛋白手電筒GFPfinder-2101GR

紅色熒光蛋白手電筒GFPfinder-2101GR可以激發(fā)DsRed, tdTomato, mCherry等多種紅色熒光蛋白，適用各種材料，如植物（水稻、小?、玉米、大豆、棉花、擬南芥）、動物（斑??、小鼠）、微生物和愈傷組織等。

紅色熒光蛋白手電筒GFPfinder-2101GR相較于傳統方法，有以下優(yōu)勢：

1. GFPfinder-2101GR可替代熒光顯微鏡，進行大批量熒光篩選。肉眼直接觀察熒光，長時間篩選不費眼。

2. 可在田間或大棚里進行活體植物篩選，無需采摘葉片。

3. 價格僅為熒光顯微鏡的十分之一。

4. 光源壽命長達5萬小時，使用數年免維護。

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