發(fā)布時間:2024-09-10 13:28:30 人氣:290 來源:析浦(上海)科學儀器
摘要:紫外輻照箱XEPU-1235L是一款模擬太陽光進行光毒性試驗的理想設備。紫外輻照箱XEPU-1235L采用UVA燈管,輻照時的UVB能量僅占1%,符合《化學品 體外3T3中性紅攝取光毒性試驗方法》標準中對光毒性試驗光源的要求。在進行光毒性試驗時,直接在紫外輻照箱的操作面板上設置照射能量或時間,一鍵開啟照射,輕松完成光毒性試驗!
光毒性(phototoxicity)是指應用于機體的物質經暴露于光線后誘發(fā)或增強的毒性反應,或者全身應用一種物質后由皮膚光照引發(fā)的反應。體外3T3中性紅攝取光毒性試驗可以用于鑒定受試物暴露于光照后由活性化學物質誘導產生的潛在光毒性。本試驗通過比較暴露于化學物質的細胞在有光照和無光照條件下細胞活性相對降低的值評價光細胞毒性,由本試驗鑒定的物質很可能具有體內光毒性,這種作用或者由于全身應用后分布于皮膚產生,或者經局部應用后產生。
本光毒性試驗方法建立的基礎是,比較有或無非細胞毒性劑量的刺激性光照射情況下化學品的細胞毒性。細胞毒性是以受試物在光照射處理24小時后與受試物濃度相關的細胞攝取活體染料中性紅的還原量來表示的。中性紅是一種弱的陽離子染料,極易以非離子擴散的方式穿透細胞膜并在細胞溶酶體內聚集。細胞表面的改變或溶酶體膜敏感性的改本導致溶酶體脆性增高等變化,并逐漸不可逆,這種變化由外來物質的作用引起,導致細胞吸收和連接 NR 的能力下降,這樣就有可能區(qū)分活的、損傷的或死亡的細胞。這是本光毒性試驗的基礎。
Balb/c3T3細胞經24小時培養(yǎng)形成單層,每種受試物用兩塊96孔培養(yǎng)板,將8個不同濃度的受試化學物質預培養(yǎng)1小時。接著將其中一塊培養(yǎng)板暴露于無細胞毒性的更高光照劑量下,另一塊培養(yǎng)板置于暗處。然后兩塊培養(yǎng)板都用細胞培養(yǎng)基代替處理培養(yǎng)基再培養(yǎng)24小時,中性紅攝取測定細胞活性。以占未處理陰性對照組的百分比表示細胞活性,分別計算每一個試驗濃度的值。通過比較有光照和無光照下獲得的濃度反應來預測潛在光毒性。
選擇合適的光源是光毒性試驗關鍵的因素。體內光毒性反應通常與UVA(長波紫外線)和可見光相關,而與UVB(中波紫外線)相關性小,但UVB卻具有較高的細胞毒性,隨著波長從313nm到280nm變化,細胞毒性增加約1000倍。
根據(jù)國際照明委員會的紫外線波長分類,315-400nm屬于UVA,280-315nm屬于UVB,100-280nm屬于UVC。
光毒性試驗的光源必須符合以下三點:
光源發(fā)射的光波長能被受試物吸收(吸收光譜)
光的劑量(在一個合理的暴露時間內能達到的劑量)能滿足已知光毒性化學物質的檢測
所用的波長和劑量不能有損于試驗系統(tǒng)
紫外輻照箱XEPU-1235L是一款模擬太陽光進行光毒性試驗的理想設備。紫外輻照箱XEPU-1235L采用UVA燈管,輻照時的UVB能量僅占1%,滿足光毒性試驗對過濾UVB的要求,貼近真實紫外線照射效果。符合《化學品 體外3T3中性紅攝取光毒性試驗方法》標準中對光毒性試驗光源的要求。
根據(jù)《化學品 體外3T3中性紅攝取光毒性試驗方法》,劑量為5J/cm2的UVA長波紫外線對Balb/c 3T3細胞無毒性作用,但足以有效地激發(fā)化學物質產生光毒性反應。例如在50min內達到5J/cm2劑量,輻照度調到1.7mW/cm2。如果使用另外的細胞系或不同的光源,照射劑量必須校準,以使劑量的選擇對細胞無害并足以對標準光學毒性物質產生激發(fā)作用。
紫外輻照箱XEPU-1235L專為體外光毒性試驗設計,在出廠時預設5J/cm2的輻照劑量,可以一鍵快速開啟照射。實驗人員也可以自定義其他照射能量值或時間值,操作簡單又靈活。
下方視頻展示了,使用紫外輻照箱XEPU-1235L進行光毒性試驗的步驟,分別展示了如何設置照射能量和照射時間。
光毒性試驗光源介紹:紫外輻照箱XEPU-1235L
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