發(fā)布時間:2023-06-12 08:37:11 人氣:514 來源:析浦科學儀器
在核酸實驗中紫外交聯(lián)儀常用于烘烤,其效率比傳統(tǒng)的烘烤法高出5-10倍,也是不可缺少的實驗器材,下面將為您詳細介紹紫外交聯(lián)儀。
紫外交聯(lián)儀簡介
由于紫外交聯(lián)儀配置了一種紫外能量程序設計系統(tǒng)(Joules/c㎡),即其中的時間積分儀連續(xù)檢測紫外光的照射。紫外交聯(lián)試驗主要用來篩選特性蛋白,主要應用于生物學等領域。
紫外交聯(lián)儀工作原理
以聚烯烴為主要原料摻入適量的光引發(fā)劑,用紫外光照射,通過光引發(fā)劑吸收特定波長的紫外光引發(fā)產(chǎn)生聚烯烴自由基,從而發(fā)生一系列快速聚合反應,生成具有三維網(wǎng)狀結構的交聯(lián)聚烯烴。
紫外交聯(lián)儀的應用
紫外交聯(lián)儀是一種多用途的254mn紫外輻射系統(tǒng),主要用于將核酸交聯(lián)于膜上。還可用于瓊脂糖凝膠中DNA的切割、RecA突變篩選、嘧啶二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化、UV滅菌消除PCR污染等。在紫外滅菌、聚合物紫外處理等方面也有應用。創(chuàng)建卵裂抑制胸腺嘧啶二聚體的基因定位,測試RecA的功能
紫外交聯(lián)儀特點
1)硬件特點
可觸摸鍵盤。
漢化液晶屏顯示。
大型不銹鋼紫外曝光室。
2)軟件特點
關機信息不丟失。
具有曝光能量手動設置功能。
具有曝光時間手動設置功能。
紫外交聯(lián)儀具有能量吸收值達到設定值時,照射將自動停止功能。
紫外光源強弱與否、時間差異與否,照射循環(huán)均都有很好的重復性。
紫外照射可使雜交信號比傳統(tǒng)烘烤法提高5-10倍。
1.開啟前
將紫外交聯(lián)儀設備水平放在工作臺上。
在開門時確保有足夠的空間
2.操作步驟
插入電源線的母頭到交聯(lián)劑。
插頭插入正確接地的電源插座中。(交聯(lián)劑的正確的工作電壓是產(chǎn)品信息的標簽上找到)。
打開ON / OFF開關到ON的位置。
預設能量和時間:按PRESET(預調設置)→ENERGY(能量),輸入所需的能量級,再按ENTER(進入)即完成能量設定;按PRESET(預調設置)→TIME(時間),輸入所需的時間,再按ENTER(進入)即完成時間設定。按PRESET(預調設置)→wavelength(波長)再按ENTER(進入)即完成波長設定。注:每次設定波長之前要換上相應的號燈管。然后按START鍵開始工作。
紫外交聯(lián)儀日常使用時條件
1.環(huán)境溫度:5-35℃
2.相對濕度:≤80%
3.經(jīng)常用軟布或海綿清潔內(nèi)室
4.保持紫外曝光室內(nèi)干燥清潔。
5.搬運時包裝應由防塵、減震物品、紙箱由里到外順序組成。
6.運輸過程中防止沖擊、劇烈震動、潮濕。
7.更換不同波長的燈管及使用的燈管損壞時,需要更換燈管。更換方法:把燈管向下拉出燈架,再將燈管兩端的插腳從軟連接插座中拔出;將新管裝入軟連接插座,再將燈管向上輕輕的推入燈架,更換完畢。
紫外交聯(lián)儀使用注意事項
1.不能在內(nèi)室表面殘留化學試劑;
2.絕不能使用清潔器清理內(nèi)室;
絕不能使用丙酮或**清潔內(nèi)室。
更換保險絲時一定要先斷掉儀器電源,打開保險絲管座的蓋,更換相應容量的保險絲,再蓋緊。
如何正確理解紫外交聯(lián)儀中三種波長UVA(365)、UVB(302)、UVC(254)
紫外線是指通過棱鏡將自然光分成赤、橙、黃、綠、青、藍、紫七色光,波長較紫色光更短的一類光線的總稱.它廣泛存在于自然界中,與人的生活密切相關。根據(jù)生物效應的不同, 將紫外線按照波長劃分為四個部分:A波段(UVA),又稱為黑斑效應紫外線(400~315nm);B 波段(UVB ) , 又稱為紅斑效應紫外線( 3 15~280nm);C 波段(UVC),又稱為滅菌紫外線(280~100nm);D 波段(UVD),又稱為真空紫外線(Vacuume UV)(200~10nm)。
析浦科學儀器相關紫外產(chǎn)品,很多年之前,紫外線就已被用于防止物體表面微生物的生長,空氣中微生物的破壞以及液體滅菌,紫外線殺菌消毒技術具有廣譜高效、無二次污染、不存在抗藥性、便于管理和實現(xiàn)自動化等諸多優(yōu)點,多年來被廣泛運用于物體表面、空氣、飲用水的消毒和廢水處理。以C 波段為主紫外線可以殺滅包括細菌繁殖體、芽胞、分支桿菌、病毒、真菌、立克次體和支原體等各種微生物。殺菌效果是由微生物所接受的紫外線輻照劑量決定的,不同種類的微生物對紫外線的敏感性不同,因此使用紫外線消毒時,必須確定合適的輻照劑量以達到滅殺目標微生物的效果。少了殺滅效率低,高了造成燈的不應有冗余。如今紫外線殺菌也應用到了手術室,開始對空氣進行消毒殺菌,上述應用都應用到了人們的日常生活中??蒲泄ぷ髡卟粩嗟难芯颗c深入,慢慢將紫外線殺菌的這種特性應用到生命科學的研究中。目前析浦科學儀器有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三種波長制造了三款紫外交聯(lián)儀,主要包括xepu-1208A(365nm)、xepu-1208B(302nm)、xepu-1208C(254nm)滿足不同的科研需求。如今基因組學蛋白組學走在時代的前沿,分子生物學相關技術得到了質的飛躍,離不開人們對未知科學的探索,在分子水平上,在紫外線照射下,核酸鏈中相鄰的嘧啶可發(fā)生二聚化,主要發(fā)生在胸腺嘧啶堿基之間。 近一百年來,研究人員一直利用紫外線的這種特性作為研究基因突變的工具??偠灾?,這些發(fā)現(xiàn)為分子生物學和細胞生物學以及其它領域中基于紫外線的應用鋪平了道路。
紫外交聯(lián)儀是一種多用途的紫外輻射系統(tǒng),主要用于將DNA或RNA交聯(lián)到尼龍膜、硝酸纖維素膜上。交聯(lián)過程僅需25–50秒。傳統(tǒng)的方法是將膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小時。與真空烘箱烘焙相比,紫外交聯(lián)儀照射可使雜交信號顯著增加。此外XEPU系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯(lián),CLIP-seq、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq、pBpa、sulfo-SDA、psoralen等雙分子交聯(lián)以及微生物滅活(例如細菌,真菌,病毒),光穩(wěn)定性驗證,瓊脂凝膠中DNA的切割,RecA突變篩選,胸腺二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化,UV滅菌消除PCR污染。在紫外滅菌,聚合物固化(例如水凝膠,甲基丙烯酸甲酯樹脂)等方面也有應用。目前析浦科學儀器XEPU系列四款紫外交聯(lián)儀,xepu-1208A(365nm)、xepu-1208B(302nm)、xepu-1208C(254nm)在功能上有著諸多的優(yōu)勢與特點,比如:
◇多種模式自由選擇:自動模式(Auto Mode)、能量模式(Energy Mode)、時間模式(Time Mode)、預設模式(Preset Mode)。
◇多種光源自由選擇:254nm(UVC)、302nm(UVB)、365nm(UVA)
◇安全性強:儀器裝有安全聯(lián)鎖裝置,當門打開或者門關閉不嚴時會自動關閉紫外光源,保護使用者安全。
◇燈管更換提示功能:當燈管功率小于初始值的60%時,此燈亮,提示用戶需要更換燈管。
◇光源分布一致性好:紫外交聯(lián)儀光源的分布,尤其是中心區(qū)域的分布一致性好,能夠保證樣品各點吸收的能量基本一致。
◇友好、安全的觀察窗:觀察窗采用3層特殊玻璃,用戶可以安全地通過此窗口觀察樣品和燈的運行狀態(tài)。
◇ 預設常用實驗程序
◇ 不同波長燈管自動識別功能
EMSA實驗
凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
紫外線誘導的突變
為明確紫外線對大豆疫霉菌的誘導突變作用?研究了紫外線誘變的突變菌株的菌落形態(tài)、菌絲生長速率、菌絲形態(tài)、卵孢子形態(tài)、產(chǎn)孢能力、同宗配合能力、致病力和抗藥性的變異情況。結果表明?大豆疫霉菌突變菌株菌落形態(tài)、菌絲生長速率、菌絲和卵孢子形態(tài)以及同宗配合能力都發(fā)生顯著變異?游動孢子產(chǎn)孢量和致病性明顯降低。