薄層色譜法TLC的原理和應(yīng)用

薄層色譜法，英文Thin Layer Chromatography，通常簡稱為TLC。薄層色譜法TLC是一種層析分離技術(shù)，可快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質(zhì)。

薄層色譜法TLC的原理是利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相（溶劑）流過固定相（吸附劑）的過程中，連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達(dá)到各成分的互相分離的目的。吸附是表面的一個重要性質(zhì)。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質(zhì)或溶解于其中的溶質(zhì)在此表面上的密集現(xiàn)象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發(fā)生吸附現(xiàn)象。

薄層色譜法TLC的優(yōu)勢

● 極大的靈活性

● 以最少的時間并行分離多個樣本

● 超高的清晰度和對所有樣品和樣品組件的同時可視化評估

● 由于單一使用固定相，簡化樣品制備

● 由于樣品的所有部分都存儲在板上，因此可以使用不同的參數(shù)對板進(jìn)行多次評估

薄層色譜法TLC的應(yīng)用場景

臨床應(yīng)用：脂質(zhì)、代謝研究、藥物篩選、興奮劑控制

工業(yè)應(yīng)用：流程開發(fā)和優(yōu)化、過程監(jiān)控、清潔驗證

食物和飼料：質(zhì)量控制、添加劑（如維生素）、殺蟲劑、穩(wěn)定性測試（有效期）

法醫(yī)學(xué)：文件偽造檢測、中毒調(diào)查、染料分析

藥物應(yīng)用：質(zhì)量控制、含量均勻性測試（CUT）、純度檢查、穩(wěn)定性測試

環(huán)境研究：水、土壤和殘留物分析

三波長TLC紫外燈

TLC板通常含有一種在紫外線下發(fā)出熒光的化合物，所以在薄層色譜法TLC中，常用254nm短波紫外線或365nm長波紫外線進(jìn)行照射，通過熒光進(jìn)行顯色觀察。

析浦三波長TLC紫外燈（型號：XEPU-1338LMS）配有一根8瓦的254nm短波紫外線燈管，一根8瓦302nm的中波紫外線燈管，和一根8瓦的365nm長波紫外線燈管，滿足薄層色譜法TLC對不同波長紫外線的要求。8瓦的大功率紫外線燈管提供均勻穩(wěn)定的紫外線照射，使實驗人員獲得理想的TLC檢測效果。

下圖：三波長TLC紫外燈（型號：XEPU-1338LMS）搭配支架進(jìn)行照射

便攜式TLC紫外觀察箱

通常，紫外燈功率越高，暗室越暗，檢測效果越好，因此推薦使用紫外觀察箱進(jìn)行TLC實驗。紫外觀察箱GFPfinder-2106UV作為一個便攜暗室，可有效隔絕周圍光線，觀測效果更好。紫外觀察箱配有透明的紫外防護(hù)面板，保護(hù)操作人員的眼鏡和面部免于短波紫外線的傷害。

下圖：便攜式TLC紫外觀察箱