發(fā)布時間:2023-12-06 11:04:10 人氣:820 來源:析浦(上海)科學(xué)儀器
在凝膠電泳實驗中,由于DNA肉眼不可見,在制備瓊脂糖凝膠時,會加入核酸熒光染料進行染色。染色后的DNA被特定波長的光照射后,會發(fā)出熒光,從而使實驗人員清楚地觀察到DNA的位置,并拍照記錄。下面給大家介紹五種常用的核酸分子熒光染料。
溴化乙錠是用于DNA染色的核酸熒光染料。它可用于凝膠混合物、電泳緩沖液中,或在運行后對凝膠進行染色。染料分子粘附在DNA鏈上,并在紫外線下發(fā)出熒光,準(zhǔn)確顯示條帶在凝膠中的位置。需要注意的是,溴化乙錠是一種潛在的致癌物,因此必須非常小心地處理。
SYBR Gold染料可用于染色雙鏈或單鏈DNA或染色RNA。SYBR Gold作為溴化乙錠的首批替代品之一上市,被認(rèn)為更加敏感。一旦與核酸結(jié)合,該染料就會表現(xiàn)出1000倍的紫外熒光增強。然后它會滲透厚且高百分比的瓊脂糖凝膠,并可用于甲醛凝膠。由于未結(jié)合分子的熒光非常低,因此不需要脫色。Molecular Probes自推出SYBR Gold以后,還研發(fā)了SYBR Safe和SYBR Green,它們是溴化乙錠的更安全替代品。
SYBR Green I 和 II 染色劑(同樣由 Molecular Probes 銷售)針對不同目的進行了優(yōu)化。 由于它們會與DNA結(jié)合,因此仍被視為潛在的誘變劑,因此應(yīng)小心處理。
SYBR Green I對于雙鏈DNA的使用更加敏感,而SYBR Green II適合與單鏈DNA或RNA一起使用。與溴化乙錠染色劑一樣,這些高度敏感的染色劑在紫外線下會發(fā)出熒光。
SYBR Safe旨在成為溴化乙錠和其他SYBR染色劑的更安全替代品。它不存在急性毒性,不作為危險廢物,通??梢耘湃胂滤老到y(tǒng)進行處理。SYBR Safe染色劑可與藍(lán)光透射儀XEPU-1126B一起使用,這樣可以減少對DNA的損傷,并為后續(xù)克隆提供更高的效率。
Eva Green是一種綠色熒光染料,與其他染料相比,它對聚合酶鏈反應(yīng) (PCR) 的抑制程度較小。這使得它對于定量實時PCR等應(yīng)用非常有用。如果您使用低熔點凝膠來回收DNA,這也是一個不錯的選擇。它在高溫下非常穩(wěn)定,其本身的熒光非常低,但與DNA結(jié)合時發(fā)出高熒光。Eva Green還被證明具有非常低或沒有細(xì)胞毒性或致突變性。
紫外透射儀XEPU-1126ML是一款雙波長紫外透射儀,同時提供中波302nm和長波365nm的紫外線照射。適用溴化乙錠Ethidium Bromide,SYBR Green,SYPRO-Orange等多種熒光染料。中波紫外線用于照膠,長波紫外線用于切膠,一臺設(shè)備就可滿足凝膠電泳實驗的多種需求!8根優(yōu)質(zhì)的紫外線燈管提供均勻的照射,照射面積高達(dá)21x26cm。
下圖是析浦藍(lán)光透射儀XEPU-1126B,提供470nm的藍(lán)光照射,適用于SYBR Safe, fluorescein等各種新型熒光染料。藍(lán)光避免了紫外線對實驗人員的傷害,同時對樣本的損傷也更小,提高了DNA克隆的效率。一鍵可切換藍(lán)光和白光,自由調(diào)節(jié)光強度。濾光蓋板可打開,固定在不同角度,切膠看膠都方便!
析浦(上海)科學(xué)儀器專業(yè)研發(fā)紫外透射儀/切膠儀,雙LED藍(lán)白光透射儀,熒光手電筒,紫外線手電筒,紫外交聯(lián)儀等多款熒光激發(fā)設(shè)備。