異硫氰酸熒光素FITC

異硫氰酸熒光素 (fluorescein isothiocyanate)，簡(jiǎn)稱(chēng)FITC。異硫氰酸熒光素FITC是由熒光素核和胺反應(yīng)性異硫氰酸酯部分組成的熒光素衍生物。異硫氰酸酯基團(tuán)與伯胺反應(yīng)，形成共價(jià)硫脲鍵，將熒光素連接到生物分子上。異硫氰酸熒光素FITC通常以由5-異硫氰酸熒光素（5-FITC）和6-異硫氰酸熒光熒光素（6-FITC）組成的異構(gòu)體的混合物的形式提供。

異硫氰酸熒光素FITC不能滲透細(xì)胞。當(dāng)與活細(xì)胞孵育時(shí)，F(xiàn)ITC將與暴露于細(xì)胞外基質(zhì)的膜蛋白上的任何游離胺基結(jié)合，從而產(chǎn)生具有微弱熒光膜的活細(xì)胞。

異硫氰酸熒光素FITC對(duì)溫度和pH都很敏感。有實(shí)驗(yàn)表明，異硫氰酸熒光素FITC標(biāo)記的綴合物的熒光信號(hào)強(qiáng)度隨著環(huán)境變得更酸性而降低。例如，當(dāng)pH從10降低到3時(shí)，F(xiàn)ITC-葡聚糖的強(qiáng)度降低了95%以上。另一方面，溫度影響FITC的穩(wěn)定性。在升高的溫度下，F(xiàn)ITC是非常不穩(wěn)定的，并且用FITC產(chǎn)生的綴合物對(duì)熒光素標(biāo)記物的水解敏感。

異硫氰酸熒光素FITC的應(yīng)用

異硫氰酸熒光素FITC是在制備與生物分子偶聯(lián)物中，最廣泛使用的熒光探針。異硫氰酸熒光素FITC廣泛應(yīng)用于綠色熒光染料熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)、抗體、肽、激素、胺修飾的寡核苷酸和其他含胺分子。FITC上的異硫氰酸酯部分（-N=C=S）與目標(biāo)生物分子上的氨基末端和伯胺基團(tuán)反應(yīng)，形成共價(jià)硫脲鍵。所得到的熒光素綴合物可在多種應(yīng)用中用作特異性探針，包括酶動(dòng)力學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和熒光原位雜交。

異硫氰酸熒光素FITC激發(fā)發(fā)射波長(zhǎng)

異硫氰酸熒光素FITC激發(fā)光峰值491nm，發(fā)射光峰值516nm。可使用藍(lán)光手電筒GFPfinder-2101RB激發(fā)異硫氰酸熒光素FITC發(fā)出熒光。

下圖：異硫氰酸熒光素FITC的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)

下圖：用于激發(fā)異硫氰酸熒光素FITC的熒光手電筒GFPfinder-2101RB

析浦科學(xué)儀器專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)熒光激發(fā)光源，可用于激發(fā)觀察各種常見(jiàn)熒光蛋白（例如GFP，EGFP，DsRed，mCherry）和熒光染料，詳情咨詢(xún)上海析浦科學(xué)儀器。

了解更多：熒光激發(fā)光源