發(fā)布時間:2023-09-26 11:14:33 人氣:532 來源:析浦(上海)科學儀器
常有同學咨詢,用紫外光是否可以看綠色熒光蛋白呢?其實,紫外光可以激發(fā)野生型GFP,但不適用于增強型的綠色熒光蛋白EGFP。今天,上海析浦科學儀器將給大家介紹常用的GFP變體的激發(fā)和發(fā)射光譜,幫助大家更好地選擇合適的熒光蛋白激發(fā)光源。
綠色熒光蛋白 (Green Fluorescent Protein, GFP) 在分子和細胞生物學中得到越來越多的應用。由于應用的多樣性,科學家們已經從原始野生型綠色熒光蛋白(wtGFP)開發(fā)出幾種變體。 其中一些變體具有與wtGFP不同的激發(fā)和發(fā)射光譜。為了在激發(fā)這些GFP時獲得更大靈敏度,使用最合適的激發(fā)波段和濾光片組非常重要。
下面為大家整理了各種GFP變體的激發(fā)光波長和發(fā)射光波長:
wtGFP激發(fā)光波長395nm,發(fā)射光波長509nm
GFPuv激發(fā)光波長395nm,發(fā)射光波長509nm
Stemmer激發(fā)光波長395nm,發(fā)射光波長509nm
EGFP激發(fā)光波長488nm,發(fā)射光波長509nm
GFP-S65T激發(fā)光波長489nm,發(fā)射光波長509nm
所以,wtGFP、GFPuv和Stemmer可以用紫外光激發(fā),而EGFP和GFP-S65T需要用藍光激發(fā)。
如果您需要觀察熒光蛋白,推薦選擇析浦科學儀器生產的GFPfinder系列激發(fā)光源,多種波段可定制,可用于不同種類的熒光蛋白。GFPfinder系列采用高性能的進口LED作為光源,亮度均勻且壽命長。有單波長(手電筒式)、雙波長和三波長(手提便攜式)可選,您可根據實驗需要定制波長,適合各種熒光蛋白的觀察和分析。
下圖是GFPfinder-2101單波長熒光手電筒,可選一種波長。
GFPfinder-2101UV:波長360-380nm,可以觀察wtGFP、GFPuv和Stemmer等野生型綠色熒光蛋白
GFPfinder-2101RB:波長440-470nm,可以觀察EGFP和GFP-S65T等增強型綠色熒光蛋白
GFPfinder-2101GR:波長510-540nm,可以觀察DsRed和tdTomato等紅色熒光蛋白
下圖是GFPfinder-2102雙波長熒光蛋白激發(fā)光源和GFPfinder-2103三波長熒光蛋白激發(fā)光源的外觀。
GFPfinder-2102可任選兩種波長,GFPfinder-2103可任選三種波長。每種波段均配有獨立開關,可分別控制,操作簡單。