sfGFP超折疊綠色熒光蛋白

Superfolder GFP超折疊綠色熒光蛋白，簡(jiǎn)稱sfGFP，是2005年發(fā)表的一種堿性（組成型熒光）綠色熒光蛋白。sfGFP來源于Aequorea victoria，分子量約為26.8kDa。sfGFP是一種非?？焖俪墒斓娜醵垠w。

綠色熒光蛋白GFP的現(xiàn)有變體在與其他蛋白融合表達(dá)時(shí)常常會(huì)錯(cuò)誤折疊。然而，sfGFP超折疊綠色熒光蛋白，即使與折疊不良的多肽融合時(shí)也能很好地折疊。與“折疊報(bào)告基因“GFP（包含“cycle-3”突變和“增強(qiáng)型GFP”突變F64L和S65T的折疊增強(qiáng)型GFP）相比，sfGFP超折疊綠色熒光蛋白顯示出改進(jìn)的圓形排列耐受性、更強(qiáng)的化學(xué)變性耐受性以及改進(jìn)的折疊動(dòng)力學(xué)。

下圖：sfGFP超折疊綠色熒光蛋白的結(jié)構(gòu)

sfGFP超折疊綠色熒光蛋白和GFP綠色熒光蛋白的區(qū)別

超折疊綠色熒光蛋白sfGFP和綠色熒光蛋白GFP的相同之處：

1）sfGFP和GFP都屬于綠色熒光蛋白。

2）sfGFP超折疊綠色熒光蛋白和GFP綠色熒光蛋白的光譜特性相似。超折疊綠色熒光蛋白sfGFP的激發(fā)光波長(zhǎng)是488nm，發(fā)射光波長(zhǎng)是510nm。和GFP一樣，sfGFP同樣可以用488nm藍(lán)光激發(fā)。

超折疊綠色熒光蛋白sfGFP和綠色熒光蛋白GFP的不同之處：

1）sfGFP超折疊綠色熒光蛋白相比GFP綠色熒光蛋白，更易溶解，折疊更快，是已知的GFP突變體中最亮的。

2）sfGFP超折疊綠色熒光蛋白即使與折疊不良的多肽融合時(shí)也能很好地折疊。

3）sfGFP超折疊綠色熒光蛋白相比GFP綠色熒光蛋白，對(duì)化學(xué)變性劑和極端溫度有更大的耐受力。

下圖：超折疊綠色熒光蛋白sfGFP的激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng)

激發(fā)sfGFP和GFP的488nm藍(lán)光手電筒

熒光手電筒GFPfinder-2101系列可選488nm的激發(fā)光，照射均勻且照度穩(wěn)定。4顆LED提供大面積且高強(qiáng)度的藍(lán)光照射，非常適合激發(fā)觀察各種綠色熒光蛋白，包括sfGFP、GFP、eGFP等。

使用熒光手電筒GFPfinder-2101激發(fā)sfGFP和GFP的方法：打開熒光手電筒GFPfinder-2101，照射含sfGFP或GFP的樣本，戴上配套的黃色熒光觀察鏡，可直接觀測(cè)熒光。盡量在環(huán)境光線暗的地方觀察，熒光效果更明顯。

下圖：熒光手電筒GFPfinder-2101RB，套裝包含一個(gè)熒光手電筒，一副熒光觀察鏡，一個(gè)拍照濾鏡

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