什么是SYBR Green

SYBR Green是一種染色劑，可用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)的多個(gè)領(lǐng)域，比如瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中核酸的熒光染色。SYBR Green在某些定量PCR方法中用作雙鏈DNA定量的染料。SYBR Green還用于在凝膠電泳中觀察和分析DNA。較高濃度的SYBR Green可用于對(duì)瓊脂糖凝膠進(jìn)行染色，以便更好地觀察DNA。除了標(biāo)記純核酸外，SYBR Green還可用于標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的DNA，用于流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡。在這些情況下，可能需要進(jìn)行RNase處理以減少細(xì)胞中RNA的背景。

SYBR Green I是一種不對(duì)稱花青染料，在分子生物學(xué)中常用作核酸染色劑。SYBR Green I 可以與DNA結(jié)合。所得DNA染料復(fù)合物能吸收497nm藍(lán)光（λmax = 497nm）并發(fā)射綠光（λmax = 520nm）。SYBR Green I染色劑優(yōu)先結(jié)合雙鏈DNA，但對(duì)單鏈DNA的染色效果較低。

SYBR Green I是溴化乙錠（ethidium bromide，EB) 的理想替代品，因?yàn)镾YBR Green I更安全，并且不存在溴化乙錠復(fù)雜的廢物處理問(wèn)題。在一項(xiàng)使用艾姆斯試驗(yàn)（測(cè)量化學(xué)品引起突變的能力）的研究中，在相同濃度下進(jìn)行測(cè)定時(shí)，SYBR Green I 的致突變性比溴化乙錠低30倍。

藍(lán)光透射臺(tái)XEPU-1126B：用于觀察SYBR Green I染色后的DNA

在凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中，用SYBR Green I進(jìn)行DNA染色后，如何觀察呢？因?yàn)镾YBR Green I在藍(lán)光激發(fā)后可發(fā)出明亮的綠色熒光，可以使用藍(lán)光透射儀XEPU-1126B照射DNA樣品進(jìn)行觀察。下圖是SYBR Green染料在藍(lán)光照射下發(fā)出綠色熒光的效果。

析浦藍(lán)光透射儀XEPU-1126B采用24顆藍(lán)光LED作為光源，照射均勻且光源壽命長(zhǎng)。適用于多種核酸分子染料，例如熒光素, AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等。析浦藍(lán)光透射儀即開即亮，從10%-99%自由調(diào)節(jié)藍(lán)光強(qiáng)度，照射面積達(dá)21*26cm，可輕松觀察熒光表達(dá)！

下圖：析浦藍(lán)光透射儀XEPU-1126B

Reference:

Singer VL; Lawlor TE; Yue S (February 1999). "Comparison of SYBR Green I nucleic acid gel stain mutagenicity and ethidium bromide mutagenicity in the Salmonella/mammalian microsome reverse mutation assay (Ames test)". Mutation Research. 439 (1): 37–47.