發(fā)布時(shí)間:2023-10-20 09:53:41 人氣:2054 來源:析浦(上海)科學(xué)儀器
紅色熒光蛋白(Red Fluorescent Protein, RFP)和綠色熒光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)都是科學(xué)研究中常用的熒光蛋白。紅色熒光蛋白R(shí)FP自發(fā)現(xiàn)以來,已衍生出許多變體。在紅色熒光蛋白R(shí)FP中,常用的一種是tdTomato。
tdTomato是一種堿性(組成型熒光)紅色熒光蛋白,可發(fā)出非常明亮的熒光,比EGFP亮6倍。tdTomato于2004年發(fā)表,源自Discosoma sp.。tdTomato是一種成熟緩慢的串聯(lián)二聚體,具有低酸敏感性。tdTomato的發(fā)射波長(zhǎng) (581 nm) 和亮度使其成為活體動(dòng)物成像研究的理想熒光蛋白選擇。tdTomato熒光蛋白與mCherry一樣具有光穩(wěn)定性。
下圖第二排為紅色熒光蛋白tdTomato的熒光
在熒光蛋白研究中,非常重要的一步是了解熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng),從而選取合適的光源激發(fā)熒光。那么,紅色熒光蛋白tdTomato的激發(fā)光和發(fā)射光分別是多少nm呢?
下圖是紅色熒光蛋白tdTomato的光譜圖
紅色熒光蛋白tdTomato的激發(fā)波長(zhǎng)峰值約在554nm,發(fā)射波長(zhǎng)峰值約在581nm。
根據(jù)上述紅色熒光蛋白tdTomato的光譜圖,如果您想觀測(cè)紅色熒光蛋白tdTomato的熒光,可以選擇波長(zhǎng)在510-540nm的綠光作為激發(fā)光。
析浦GFPfinder-2101GR熒光手電筒的照射光波長(zhǎng)就在510-540nm區(qū)間,可用于觀察tdTomato, DsRed等多種常見紅色熒光蛋白。同時(shí),析浦GFPfinder-2101GR熒光手電筒隨機(jī)提供一副紅色觀察眼鏡和一個(gè)單反拍照濾鏡,佩戴眼鏡即可輕松觀測(cè)紅色熒光蛋白tdTomato的明亮熒光,并拍照記錄!
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下圖是用GFPfinder-2101GR觀察紅色熒光蛋白在植物幼苗上的表達(dá)