利用熒光蛋白進行轉基因種子和愈傷組織的陽性轉化鑒定

植物的轉基因遺傳轉化過程中，利用熒光蛋白（例如綠色熒光蛋白GFP，紅色熒光蛋白RFP，黃色熒光蛋白YFP）作為標簽蛋白能夠在早期愈傷階段輔助篩選檢測陽性轉化的愈傷組織，并實時分揀出陽性愈傷組織進行后續(xù)培養(yǎng)。

在利用熒光蛋白進行陽性轉化鑒定，分選陽性轉基因種子和愈傷組織時，分為兩步：

1. 先要通過合適波長的激發(fā)光照射種子和愈傷組織，激發(fā)熒光信號

2. 根據(jù)種子和愈傷組織的熒光表達結果進行實時分選

在觀測轉基因種子和愈傷組織的熒光時，通常需要在黑暗環(huán)境中進行。這是因為熒光屬于可見光，過亮的環(huán)境光線會干擾實驗人員觀察熒光信號。

為了方便科研人員快速激發(fā)、觀察并分選陽性轉基因種子和愈傷組織，析浦科學儀器專門研發(fā)了一款新型熒光蛋白激發(fā)觀察裝置GFPfinder-2106，可快速分選轉基因種子和愈傷組織。

下圖：用于快速分選轉基因種子和愈傷組織的熒光蛋白觀察箱GFPfinder-2106

熒光蛋白觀察箱GFPfinder-2106標配一臺高強度熒光蛋白激發(fā)燈，一個便攜觀察暗箱，和一片特制濾光片。高強度的熒光蛋白激發(fā)燈讓微弱熒光也一目了然，搭配熒光蛋白觀察暗箱，更好地避免環(huán)境光線的干擾，可輕松分選轉基因種子和愈傷組織！

使用熒光蛋白激發(fā)觀察裝置GFPfinder-2106分選轉基因種子和愈傷組織的步驟

在使用熒光蛋白激發(fā)觀察裝置GFPfinder-2106分選轉基因種子和愈傷組織時，可參考以下步驟：

1. 將熒光蛋白激發(fā)觀察裝置GFPfinder-2106放置在水平面上。

2. 將熒光蛋白激發(fā)燈放在箱體上方的卡槽內，將熒光蛋白激發(fā)燈接入電源。

3. 將濾光片插入箱體前方的卡槽內。
   

4. 將種子和愈傷組織樣品放入熒光蛋白觀察箱內。盡量將樣品平鋪，以保證每個樣品被均勻地被照射，避免樣品堆疊影響激發(fā)效果。

5. 打開熒光蛋白激發(fā)燈尾部的開關。熒光蛋白激發(fā)燈有3組光源，建議打開所有光源，因為激發(fā)光強度越高，熒光表達會更明顯。

6. 透過濾光片，觀測種子和愈傷組織的熒光信號，在觀察箱內進行實時分選。

下圖：使用熒光蛋白激發(fā)觀察裝置GFPfinder-2106，觀察到的紅色熒光蛋白在植物愈傷上的表達

熒光蛋白激發(fā)觀察裝置GFPfinder-2106集合熒光蛋白的激發(fā)、觀測和分選三大功能于一體，使科研人員可以快速鑒定轉基因種子和愈傷組織的轉化情況，并快速分選大批量的轉基因種子和愈傷組織。

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