皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn) Skin Photoallergy Test

皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)，又稱為皮膚光過敏反應(yīng)測試（Skin Photoallergy Test），在化妝品行業(yè)用于評估與測試人體重復(fù)接觸化妝品原料及其產(chǎn)品，并在日光(UVA紫外線)照射下引起皮膚光變態(tài)反應(yīng)的可能性，以此來評估化妝品的安全性。

皮膚光變態(tài)反應(yīng)是指，皮膚重復(fù)性接觸受試物并經(jīng)過UVA紫外線照射，通過作用于機(jī)體免疫系統(tǒng)，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生光過敏狀態(tài)，經(jīng)過一定間歇期后，皮膚再次接觸同一受試物并在UVA紫外線照射下，引起特定的皮膚反應(yīng)，其反應(yīng)形式包括紅斑，水腫，脫屑剝落等。

皮膚光變態(tài)反應(yīng)的原理是，光感物質(zhì)吸收光能后成激活狀態(tài)，并以半抗原形式與皮膚中的蛋白結(jié)合成受試物一蛋白結(jié)合物，經(jīng)表皮的郎罕氏細(xì)胞傳遞給免疫活性細(xì)胞，致敏的淋巴細(xì)胞引發(fā)免疫反應(yīng)。致敏的淋巴細(xì)胞再次接觸同一抗原時(shí)釋放出淋巴因子，導(dǎo)致一系列有害反應(yīng)。

化妝品原料在紫外線及可見光譜(290-700nm)有吸收，具有光穩(wěn)定性，以及根據(jù)SAR結(jié)果提示具有潛在的或不良的光效應(yīng)。如果某物質(zhì)在 290-700nm的摩爾消光系數(shù)不超過1000L/mol.cm 時(shí)，無需提供光過敏試驗(yàn)的相關(guān)數(shù)據(jù)。

皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的具體方法

皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)分為誘導(dǎo)階段（induction phase）和激發(fā)階段（elicitation phase）。在皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中，將實(shí)驗(yàn)動物頸部的皮膚去毛，多次涂抹誘導(dǎo)劑量的化妝品原料，且多次暴露于一定劑量的UVA紫外線(日光)下，誘導(dǎo)特定免疫系統(tǒng)（誘導(dǎo)階段），經(jīng)過一定間歇期后，在動物背部去毛皮膚給予激發(fā)劑量的受試物后暴露于一定劑量的UVA紫外線(日光)下，觀察實(shí)驗(yàn)動物（激發(fā)階段），并與對照動物比較對激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度。肉眼觀察涂抹照射部位的皮膚局部反應(yīng)，進(jìn)行評估。如果出現(xiàn)小塊紅斑、中度紅斑和融合紅斑、重度紅斑和水腫，則說明存在皮膚光變態(tài)反應(yīng)。

皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的結(jié)果應(yīng)能得出受試物的光致敏能力和強(qiáng)度。需要注意的是，動物試驗(yàn)結(jié)果只能在很有限的范圍內(nèi)外推到人類。引起豚鼠強(qiáng)烈反應(yīng)的物質(zhì)在人群中也可能引起一定程度的皮膚光變態(tài)反應(yīng)，而引起豚鼠較弱反應(yīng)的物質(zhì)在人群中也許不能引起皮膚光變態(tài)反應(yīng)。

下圖：皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中，豚鼠接收UVA紫外線的照射（左圖為誘導(dǎo)階段，右圖為激發(fā)階段）

皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的UVA光源

在皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的誘導(dǎo)階段，選擇波長為320nm~400nm的UVA紫外線，或者UVA+少量UVB（UVB的劑量不得超過0.1J/cm²）進(jìn)行照射。

在皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的激發(fā)階段，選擇UVA光源，照射劑量為10.2J/cm²。注意：不同的動物試驗(yàn)方法，誘導(dǎo)與激發(fā)的UVA紫外線劑量不同，可根據(jù)具體選用的方法來確定UVA紫外線照射的劑量。

析浦紫外線輻照箱XEPU-1235L

1）紫外線輻照箱XEPU-1235L采用3-5根高性能UVA紫外線燈管，提供均勻UVA紫外線照射，并將UVB能量控制在1%左右，非常適合皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中的UVA誘導(dǎo)和激發(fā)。

2）紫外線輻照箱XEPU-1235L采用微處理器控制，用戶可精準(zhǔn)設(shè)定符合皮膚光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的UVA照射劑量。如需用UVA光源照射10.2J/cm²的劑量，直接在鍵盤上輸入10.2即可，操作十分簡單！

3）在使用UVA照射受試物的過程中，實(shí)驗(yàn)人員可通過透明觀察窗實(shí)時(shí)觀測輻照箱內(nèi)受試物的情況。同時(shí)，觀察窗可有效隔絕紫外線，保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全。

下圖：UVA紫外線輻照箱XEPU-1235L，可用于皮膚光變態(tài)反應(yīng)的UVA光源

Reference: Photoallergic Contact Dermatitis in Guinea Pigs: Improved Induction Technique Using Freund's Complete Adjuvant