發(fā)布時間:2024-02-05 18:10:24 人氣:446 來源:析浦(上海)科學(xué)儀器
DNA凝膠電泳(DNA Gel Electrophoresis)是一種通過一種稱為瓊脂糖凝膠來分離DNA片段的方法。瓊脂糖凝膠來源于海藻多糖,形成小孔,能把不同大小的DNA分離。較小的DNA分子比大分子更快且更容易地通過孔。裝載孔定向在凝膠的頂部,以允許將PCR產(chǎn)物插入凝膠中。施加電流以使帶負電荷的DNA分子遠離負電極(-)并朝向正電極(+)移動。DNA在凝膠中以單一的垂直通道遷移。有三個因素影響DNA分子的運動速度:電場的電壓,瓊脂糖的濃度,以及最重要的是,DNA分子的大小。
凝膠電泳可以通過大小來區(qū)分DNA。較大的DNA片段移動沒有較小的DNA片段移動快,并且DNA片段的大小與遷移的距離之間存在非線性關(guān)系。使用DNA ladder(具有已知片段大小的樣本)以確定實驗中DNA條帶的大小。
DNA本身在瓊脂糖凝膠中是不可見的。因此,在進行DNA凝膠電泳實驗時,需要將熒光染色劑添加到凝膠中,凝膠結(jié)合DNA,在紫外透射儀的照射下,會發(fā)出熒光,從而使實驗人員看到DNA以明亮條帶的形式出現(xiàn)在瓊脂糖凝膠上。
凝膠電泳實驗中的DNA染色主要有兩種方法:
預(yù)染色(Pre-stain):DNA染色劑在熔化后加入瓊脂糖凝膠混合物中,但在倒入凝膠之前。
后染色(Post-stain):凝膠電泳后,將凝膠在染色溶液中孵育。
下圖:DNA凝膠電泳示意圖
析浦紫外透射儀XEPU-1126系列專為DNA凝膠電泳實驗設(shè)計,通過均勻高強度的紫外線透照,使DNA條帶發(fā)出明亮的熒光,讓實驗人員可以輕松看膠、照膠、切膠!紫外光強度可自由調(diào)節(jié),滿足不同濃度樣品的照射需求。
下圖:析浦雙波長紫外透射儀XEPU-1126ML,提供302nm中波紫外線和365nm長波紫外線,一鍵切換波長,滿足不同實驗需求。