發(fā)布時間:2024-06-20 08:16:53 人氣:448 來源:析浦科學儀器
很多同學都以為所有的GFP都是一種熒光蛋白,用熒光顯微鏡或者便攜式GFP熒光手電筒觀察GFP熒光是采用同一個通道或者同一個波段,結果觀察熒光經(jīng)常遇到無法看到GFP的表達,今天,析浦技術工程師給大家解釋一下觀察不到GFP熒光的原因:
下圖為avGFP熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射光譜圖:
由上圖可以看出,avGFP綠色熒光蛋白的激發(fā)波長在350-410nm,激發(fā)波長(excitation:EX)的主峰在395nm,發(fā)射波長(emission :Em) 的主峰為509nm,所以,avGFP綠色熒光蛋白需要用紫外波段去激發(fā),才能看到avGFP綠色熒光蛋白發(fā)出的509nm的綠色熒光。
下圖為mGFP熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射光譜圖:
由上圖可以看出,mGFP綠色熒光蛋白的激發(fā)波長在450-505nm,激發(fā)波長(excitation:EX)的主峰在495nm,發(fā)射波長(emission :Em)的主峰為513nm,所以,mGFP綠色熒光蛋白需要用藍光波段去激發(fā),才能看到mGFP綠色熒光蛋白發(fā)出的513nm的綠色熒光。
盡管uVGFP和mGFP都是綠色熒光蛋白,但兩種熒光蛋白的激發(fā)波長完全不一樣,如果觀察uVGFP的熒光,建議選用GFPfinder-2101UV 365nm熒光手電筒,如果觀察mGFP的熒光,建議選用GFPfinder-2101RB 480nm熒光手電筒。如果您要觀察熒光蛋白的表達,析浦科學儀器為終端客戶提供GFP熒光手電筒樣機免費試用。
上圖:綠色熒光蛋白GFP在玉米種子上的表達
用GFPfinder-2101RB熒光手電筒觀察GFP在小鼠上的表達